Флуориметрія (люмінесцентний аналіз)

Заказать работу

ЗМІСТ

Вступ…………………………………………………………………..

4

1

ОГЛЯД БІОЛОГІЧНОЇ СКЛАДОВОЇ БІОТЕХНІЧНОЇ СИСТЕМИ

5

1.1

Опис методу.……………………………………………………………

5

1.2

Застосування флуориметрії ……………………………………………

11

2

2.1

2.2

АНАЛІЗ ТЕХНІЧНОЇ СКЛАДОВОЇ ..…. ……………………………

Опис флуориметра ……………………………………………………..

Порівняльні характеристики флуориметрів…………………………..

13

14

19

3

3.1

3.2

3.3

ОЦІНКА ФУНКЦІОНАЛЬНИХ ХАРАКТЕРИСТИК БІОТЕХНІЧ-НОЇ СИСТЕМИ …...…………..………………………………………..

Класифікація біотехнічної системи …………….. ….………………..

Ефективність біотехнічної системи……... ……………………………

Оцінювання надійності біотехнічної системи ………………………

20

20

20

21

ВИСНОВОК……………………………………………………………..

25

Список використаної літератури …………………………

Додатки..……………………………………………………………...

26

27

ВСТУП

Флуориметрія (люмінесцентний аналіз) заснований на вимірюванні вторинного випромінювання, що виникає в результаті взаємодії ультрафіолетового випромінювання з визначальним компонентом. Зміст катіонів, що не володіють власною люмінесценцією, визначають за допомогою флуоресцентних реакцій комплексів катіонів з органічними реагентами. Для визначення змісту індію, галію, танталу і ін. Флуориметричний метод аналізу заснований на порушенні електронних спектрів випускання молекул визначаємої речовини при зовнішньому УФ-опроміненні і вимірі інтенсивності нх фотолюмінесценції. Для виникнення явища люмінесценції молекули речовини необхідно перевести з основного стану в збуджений з тривалістю його існування, достатньою для здійснення радіаційного електронного переходу зі збудженого стану в основний. Це можливо для молекул з відносно стійким збудженим станом [2].

Флуориметричні методи застосовують тоді, коли відсутні колориметричні методи, досить чутливі або досить виборчі щодо обумовленого елемента. В неорганічному аналізі найчастіше виділяють іони металів у вигляді їх флуоресціюючих комплексів з органічними аддендів у водному розчині або після екстракції органічними розчинниками[3].

Мета курсової роботи розглянути та проаналізувати систему флуориметрії, розглянути прилади для флуориметрії та на їх основі розробити структурну та функціональну схеми для даних типів приладів.

Завдання курсової роботи:

1. Провести огляд біологічної складової біотехнічної системи та проаналізувати принципи взаємодії її з технічною складовою.

2. Провести аналіз технічної складової біотехнічної системи.

3. Розробити схему електричну структурну та схему електричну функціональну біотехнічної системи.

4. Здійснити оцінювання функціональних характеристик біотехнічної системи (провести її класифікацію, оціннювання ефективності та надійності).

5. Сформулювати висновки за підсумками проекту.

1 ОГЛЯД БІОЛОГІЧНОЇ СКЛАДОВОЇ БІОТЕХНІЧНОЇ СИСТЕМИ

1.1 Опис методу

Флуориметрія - метод визначення концентрації речовини по інтенсивності випромінювання, що виникає після поглинання ним енергії збуджуючого випромінювання. Діапазон збудливого і порушуваного оптичного випромінювання досить широкий і простягається від ультрафіолету до ближнього ІЧ (близько 220-1100 нм). Принцип методу флуориметрії полягає в пропорційності між інтенсивністю фотолюмінесценції аналізованого зразка і кількістю визначаємих речовини. Флуориметрія знаходить застосування в таких напрямках, як [1]:

Ідентифікація. Характер спектра флуоресценції, а також колір випромінюваного світла специфічні для будь-якої флуоресціюючої речовини[1].

Кількісний аналіз. При кількісних визначеннях інтенсивність флуоресценції випробуваного зразка порівнюють з інтенсивністю флуоресценції стандартного зразка речовини з відомою концентрацією, яка вимірюється в ідентичних умовах на одному і тому ж приладі[1].

Методика. Згідно фармакопейної статті випробуваний зразок розчиняють в розчиннику або в суміші розчинників. Переносять розчин в кювету флуориметра і висвітлюють променем збуджуючого світла з вказаною в методиці довжиною хвилі[1].

Флуориметричний метод аналізу заснований на порушенні електронних спектрів випускання молекул визначаємої речовини при зовнішньому УФ-опроміненні і вимірі інтенсивності нх фотолюмінесценції. Для виникнення явища люмінесценції молекули речовини необхідно перевести з основного стану в збуджений з тривалістю його існування, достатньою для здійснення радіаційного електронного переходу зі збудженого стану в основний. Це можливо для молекул з відносно стійким збудженим станом [2].

В основі різноманітних хімічних і фізико-хімічних методів аналізу лежать, як правило, реакції трьох типів кислотноосновного, окислювально-відновні і комплексоутворення. Значення їх в практиці аналізу приблизно однаково, але наукові дослідження зосереджені переважно навколо реакцій двох останніх типів. Теорія кислотно-основних взаємодій непогано розроблена. Правда, в даний час увага прикута до кислотно-основних реакцій в наведених розчинах. Окислювально-відновні реакції знаходять все нові застосування в різноманітних фізико-хімічних методах аналізу, і тому їх досліджують вельми інтенсивно. Однак особливо велике значення має вивчення процесів комплексоутворення для фотометричного і флуориметричного аналізу з використанням органічних реагентів, кінетичних методів аналізу, методів поділу елементів [2].

Флуориметричний метод є найбільш чутливим методом аналізу в ТШХ. Визначення кількості речовини в плямі цим методом можна проводити двояко по-перше, вимірюванням флуоресценції комплексних сполук, що утворюються при взаємодії досліджуваної речовини з флуорогенним реагентом, що вводиться при обприскуванні пластинки з проявником. По-друге, по гасінню флуоресценції введеного в шар сорбенту. Найкращі результати в цьому способі флуориметрії можуть бути отримані при використанні можливо тонших шарів сорбенту, хоча при цьому знижується чутливість визначення. Відносна помилка вимірів 3-8% [2].

Викликає подив, що флуориметричні методи аналізу розчинів до сих пір використовуються відносно мало. Одним з найбільш відомих застосувань флуориметрії є аналіз для визначення урану, що виконується, однак, не в розчині. Пробу сплавляють з фторидом натрію в твердий перл і в ньому визначають зміст урану. Навпаки, берилій в силікатних породах визначають в розчинах, використовуючи утворюється комплекс з морином (пентаоксіфлавоном). Подібним же чином визначають слідові кількості галію в породах, використовуючи жовту флуоресценцію комплексу з 8-оксихинолином. Метод поєднує простоту з відтворюваністю і точністю[3].

Флуориметрія (люмінесцентний аналіз) заснований на вимірюванні вторинного випромінювання, що виникає в результаті взаємодії ультрафіолетового випромінювання з визначальним компонентом. Зміст катіонів, що не володіють власною люмінесценцією, визначають за допомогою флуоресцентних реакцій комплексів катіонів з органічними реагентами. Для визначення змісту індію, галію, танталу і ін. Флуориметричним методом використовують наприклад, родаміновие барвники. Флуориметричні методи характеризуються низькою межею виявлення (10-7), але вони часто є недостатньо селективними. Використовуються в основному для визначення вмісту мікродомішок в матеріалах високої чистоти[3].

Флуориметричні методи застосовують тоді, коли відсутні колориметричні методи, досить чутливі або досить виборчі щодо обумовленого елемента. В неорганічному аналізі найчастіше виділяють іони металів у вигляді їх флуоресціюючих комплексів з органічними аддендів у водному розчині або після екстракції органічними розчинниками[3].

Потужність флуоресцентного та фосфоресцентних випромінювання, що випускається пробою, є прямою функцією квантового виходу. Тому квантовий вихід цікавить процесу люмінесценції повинен бути постійним і відтвореним, якщо необхідно розробити успішний флуориметричний або фосфориметричний метод аналізу. Коли квантовий вихід значно зменшується, то кажуть, що люмінесценція загасає. На жаль, багато сторонні речовини можуть впливати на квантовий вихід і тушкувати люмінесценцію. Зокрема, важкі атоми або парамагнітні частинки сильно впливають на швидкість інтеркомбінаційної конверсії, яка, в свою чергу, змінює квантовий вихід флуоресценції або фосфоресценції, тим самим приводячи до похибки в аналізі. У фосфориметрії, звичайно, бажано збільшити швидкість інтеркомбінаційної конверсії, в той час як в флуориметрії - зменшити. Тому, для того щоб запобігти гасіння в більшості флуориметричних методик, важкі атоми і парамагнітні частинки повинні бути вилучені з розчину проби. Кисень, будучи парамагнітним, є особливо серйозною перешкодою, і його також видаляють, пропускаючи азот через аналізовані розчини [3].

Явище люмінесценції широко використовується в хімії для дослідження процесів, пов'язаних зі змінами електричної енергії в різних процесах. Зміна спектрів збудження або випускання (визначення див. нижче) несе в собі важливу інформацію про хімічний склад системи, кінетики процесів, формах знаходження флуорофора в гомогенних і гетерогенних середовищах. В основі люмінесценції лежить явище випускання світла часткою, що знаходиться в збудженому електронному стані[4].

За методом збудження люмінесценції ділиться на фото-, електро- і хемілюмінесценцію; за часом життя і мультиплетності порушеного і основного станів - на флуоресценцію і фосфоресценцію. Флуоресценція - швидко загасаюче випромінювання, пов'язане з переходом між станами без зміни мультиплетності системи, наприклад, із збудженого синглетного в основний синглетний стан. Фосфоресценція - повільно загасаюче випромінювання, що відповідає переходу між станами з різною мультиплетністтю, наприклад, з триплетного в синглетне. Довжина хвилі випускання і час життя збудженого стану є індивідуальними характеристиками флуорофора. При наявності в системі декількох компонентів флуророфоров їх індивідуальне визначення можливо на основі спектральних і / або тимчасових характеристик[4].

Для схематичного зображення процесів, що відбуваються при поглинанні, перетворенні і випущенні енергії в процесі люмінесценції часто використовують діаграми Яблонського, що представлені на рисунку 1.1. Різні стани з наборами відповідних їм коливальних рівнів: S0, S1, S2 – електронні стани з однаковою мультиплетністтю; Т1 – триплетний електронний стан [4].

Рисунок 1.1 – Діаграма Яблонського [4]

На відміну від спектрів, що відповідають поглинанню енергії, спектри, відповідають випромінюванню енергії, називають спектрами випускання, або спектрами флуоресценції (фосфоресценції) - залежність інтенсивності випускається випромінювання від його довжини хвилі. При цьому збудження системи (В разі фотолюмінесценції) забезпечується опроміненням з фіксованою довжиною хвилі. Розрізняють також і спектри збудження флуоресценції, які мають залежність інтенсивності випромінювання при фіксованій довжині хвилі від довжини хвилі збудження. Якщо випускання збудженої молекули відбувається з єдиного стану, то спектр поглинання збігається за формою з спектром збудження флуоресценції [4].

На практиці можливість запису того чи іншого спектру реалізується різними способами. Так, спектр поглинання реєструється шляхом запису інтенсивності сигналу, що пройшов крізь зразок від джерела випромінювання до фотоприймача (рис. 1.2) при зміні довжини хвилі випромінювання, що пройшов через монохроматор [4].

Рисунок 1.2 – Оптична схема реєстрації поглинання випромінювання однопроменевим приладом [4]

Найбільш часто для отримання спектрів флуоресценції, а також спектрів збудження флуоресценції апаратно реалізується інша оптична схема, що представлена на рисунку 1.3.

Рисунок 1.3 – Оптична схема реєстрації флуоресценції, що записується при різних режимах роботи монохроматорів [4]

У ній джерело випромінювання і фотоприймач, якщо дивитися від зразка, знаходяться під прямим кутом один до одного для зменшення попадання збудливого випромінювання в детектор. Крім того, часто в приладах існує можливість розкладання в спектр як збудливого, так і випускається зразком випромінювання. Для цього в нього вводять два монохроматора. Якщо за допомогою монохроматора 1 фіксують довжину хвилі випромінювання
(lвозб), а для запису випускання використовують монохроматор 2, то в результаті
отримують спектр випускання (флуоресценції) зразка. Якщо ж за допомогою
монохроматора 2 фіксують довжину хвилі випускання (lісп.), то змінюючи довжину хвилі монохроматора 1, отримують спектр збудження флуоресценції зразка[4].

У разі єдиного випускає збудженого стану спектр випускання (флуоресценції) не залежить від довжини хвилі збудження. надлишок енергії збудження над нижчим електронно-коливальних збудженим рівнем (S1) витрачається на внутрішню конверсію флуорофора. Цей факт є основоположним при доказі присутності в системі флуорофора. Для флуорофорів виконується правило дзеркальної симетрії Левшина, згідно з яким спектри поглинання і
люмінесценції, побудовані в одних координатах, є дзеркальними відображеннями один одного (рис. 1.4). Якщо в спектрі поглинання присутній кілька смуг, то дзеркальної по відношенню до спектру люмінесценції є смуга, що відповідає порушеній станом, з якого відбувається випускання. За допомогою правила Левшина можна ідентифікувати такі смуги поглинання[4].

Рисунок 1.4 – Спектри збудження флуоресценції, що представлені в одних координатах [4]

Правило Левшина виконується, якщо близькі геометрії молекул в основному та збудженому станах, а також енергії їх коливальних рівнів в цих станах, що відраховані від енергії нульових коливань[4].

Збудження, як правило, відбувається з нижчого коливального рівня основного стану на випадковий (відповідний конкретної енергії поглинутого кванта) рівень. Тому форма піку в спектрі поглинання відповідає розподілу коливальних рівнів збудженого стану. Випускання ж, як правило, протікає після
внутрішньої конверсії (або релаксації) з більш високих коливальних рівнів електронного збудженого стану на нижчий. розподіл квантів випускання по енергіях в такому випадку відповідає коливальним рівнями основного стану[4].

У ряді випадків можуть спостерігатися відхилення від цього правила. зазвичай це пов'язано з різницею в геометрії молекул в основному і збудженому станах або формуванням специфічних збуджених частинок, таких як Ексімер або ексіплекси. При порушенні флуоресценції в конденсованої фазі спостерігається зрушення ліній спектру випускання в довгохвилбову область, званий зрушенням Стокса. Важливою характеристикою флуоресценції є квантовий вихід, що є відношенням випущених і поглинених фотонів. В межі він дорівнює одиниці, в разі, якщо всі збуджені молекули переходять в основний стан (релаксує) через радіаційний шлях. Ставлення молекул, релаксируючих по випромінювальному і безвипромінювальному шляхах, можна також висловлювати через швидкості випускання фотона і швидкості безвипромінювальній конверсії. Тоді квантовий вихід, близький до одиниці, відповідає тому, що константа швидкості внутрішньої безвипромінювальній конверсії набагато менше константи швидкості випускання фотона[4].

Розрізняють також і енергетичний вихід флуоресценції, а саме -
ставлення енергії що була випущена і поглиненої енергії. Розрахувати його можна, домножимо квантовий вихід на ставлення енергій що були випущені і поглинених квантів. Оскільки випускання відбувається на більш довгих хвилях (рис. 1.4), енергії квантів випускання менше. Це ж показано і на діаграмі
Яблонського (рис. 1.1), де видно, що внутрішня конверсія призводить до
зменшення енергії випускаються квантів по відношенню до поглинутої. Таке зменшення називається стоксовими втратами. Через таких втрат енергетичний вихід флуоресценції завжди менше одиниці, навіть якщо квантовий вихід і кількісний. На вихід флуоресценції впливає і середовище, що оточує молекули
флуорофора. Оскільки процеси поглинання і випускання світлових квантів є статистичними, то склад середовища може позначатися на ефективності процесу. Так, розчинений кисень має ефект гасіння флуоресценції, пов'язаним з безизлучательним перенесенням енергії збудженого стану флуорофора на молекули кисню. отже, при дослідженні флуоресцентних властивостей речовини необхідно брати до увагу не тільки процеси, що відбуваються безпосередньо за участю молекул флуорофора, а й процеси за участю навколишнього його середовища [4].

При експериментальному вимірюванні квантового виходу вважають, що мірою числа випущених квантів є площа під спектром флуоресценції, то
тобто ці величини прямо пропорційні один одному. Також вважають, що і
число поглинених квантів пропорційно оптичної щільності. Найчастіше квантовий вихід (j) люмінесценції (флуоресценції або фосфоресценції) досліджуваної речовини визначають по відношенню до іншого речовині, званому стандартом, для якого він відомий. цей спосіб найбільш простий експериментально, а виміряний таким способом квантовий вихід називають відносним квантовим виходом. Для його розрахунку потрібно виміряти в однакових умовах площі під спектрами випускання як досліджуваної речовини, так і стандарту (Si), оптичні щільності цих речовин на довжині хвилі збудження (Di), а також показники заломлення розчинників (ni), в яких відбуваються дослідження. Розрахунок проводять за формулою[4]:

(1.1)

Флуоресценція органічних сполук охоплює спектральную область від 200 до 830 нм [5].

Як правило, довжина хвилі флуоресцентного випромінювання більше довжини хвилі збудження на 20 - 30 нм і більш через втрату частини енергії в збудженому стані (Стокс зрушення). Поглинання і випускання випромінювання здійснюється завдяки переходу електронів між різними енергетичними рівнями або молекулярними орбіталями. Випускання світла відбувається через певний проміжок часу після його поглинання; цей проміжок часу є тривалість перебування молекули в збудженому стані. Для більшості флуоресціюючих речовин час загасання флуоресценції становить зазвичай 10-9 - 10-8 с. Короткий час життя флуоресценції відрізняє цей тип люмінесценції від фосфоресценції, яка представляє собою довгоживучі світіння, що має час життя від 10-3 с до кількох хвилин[5].

Метод флуориметрії в 10 - 100 разів чутливіший абсорбційної спектрофотометрії, але флуоресцентними властивостями володіє тільки обмежене коло сполук: ароматичні, особливо з конденсованими структурами, гетероциклічні та карбонільні сполуки. З фармацевтичних субстанцій визначенням методом флуориметрії підлягають амінокислоти (фенілаланін, триптофан, тирозин), алкалоїди (стрихнін, резерпін, хінін), вітаміни (фолієва кислота, рибофлавін, ретинолу ацетат), стероїдні гормони (етинілестрадіол).
Інтенсивність флуоресценції вимірюється в умовних одиницях, пропорційних відгуку детектора і позначається символом I[5].

Спектр випускання флуоресценції є залежність інтенсивності флуоресценції від довжини хвилі (в нм) або частоти (в см-1) при заданій довжині хвилі збудження. Спектр збудження флуоресценції є залежність інтенсивності випромінювання в максимумі випущення флуорофора від довжини хвилі або частоти збуджуючого світла. При цьому спектр збудження зазвичай збігається зі спектром поглинання, так само як і інтенсивність флуоресценції пропорційна світлопоглинанню. Комбінування спектрів випускання, отриманих при різних довжинах хвиль збудження, дає тривимірну карту випускання[5].

1.2 Застосування флуориметрії

Ідентифікація. Спектри флуоресценції специфічні для визначених речовин. Тому флуоресценція може бути застосована для їх ідентифікації[5].

Кількісний аналіз. При кількісних визначеннях інтенсивність флуоресценції розчину випробуваного зразка порівнюють з інтенсивністю флуоресценції розчину стандартного зразка флуоресціюючого речовини відомої концентрації, яка вимірюється в ідентичних умовах на одному і тому ж приладі[5].

Методика. Розчиняють випробуваний зразок в розчиннику або в суміші розчинників, зазначених у нормативній документації. Переносять розчин в кювету або пробірку флуориметра і опромінюють збудливим світлом при довжині хвилі, зазначеної в нормативної документації. Вимірюють інтенсивність світла, що випускається під кутом 90о до збудливій світла після проходження через світлофільтр або монохроматор, що пропускає переважно випускається діапазон довжин хвиль[5].

Послідовність виконання аналізу. Спочатку в прилад поміщають розчинник або суміш розчинників, використовуваних для розчинення речовини, і встановлюють пристрій, що реєструє на нульове значення. Потім вводять розчин стандартного зразка і встановлюють чутливість приладу таким чином, щоб відгук показань був не менше 50. Якщо для регулювання чутливості потрібна зміна ширини щілини, повинні бути повторені обнулення приладу на розчинник і вимірює інтенсивність флуоресценції стандартного зразка. Після цього вводять розчини досліджуваних зразків невідомої концентрації і реєструють показання приладу. У разі лінійної залежності інтенсивності світла, що випускається від концентрації речовини розраховують останню в випробуваному розчині (C) за формулою[5]:


, (1.2)

де C0 - концентрація речовини в стандартному розчині;

I - інтенсивність світла, що випускається випробуваним розчином;

I0 - інтенсивність світла, що випускається стандартним розчином[5].

Якщо інтенсивність флуоресценції не пряма пропорційна концентрації розчину, вимір може бути зроблено з використанням калібрувальної кривої.
У деяких випадках вимір флуоресценції випробуваного зразка може бути виконано щодо незалежного стандарту (наприклад, флуоресцентного скла або розчину іншого флуоресцентного речовини). В якості стандартів можуть бути використані: розчин відомої концентрації хініну в 0,05 М розчині сірчаної кислоти або розчин флуоресцеїну в 0,1 М розчині натрію гідроксиду. У таких випадках концентрацію випробуваного зразка слід визначати з використанням попередньо отриманої в тих же умовах калібрувальної кривої[5].

2 АНАЛІЗ ТЕХНІЧНОЇ СКЛАДОВОЇ

Для проведення флуориметричного аналізу використовують прилади двох типів: фільтраційний флуориметр і Спектрофлуориметр. Фільтраційний флуориметр складається з джерела випромінювання, первинного фільтра довжин хвиль, камери для зразка, вторинного фільтра довжин хвиль і системи детектування флуоресценції. Як правило, детектор поміщений під кутом 90о до збудливого світлового потоку. Геометрія прямого кута передбачає детектування тільки виробленого флуоресцентного сигналу. Однак детектор все-таки отримує частину збудливого випромінювання в результаті розсіювання властивостей самого розчину, а також через присутність в розчині твердих частинок. Для усунення цього залишкового розсіювання використовуються спектральні фільтри. Первинний фільтр відбирає короткохвильове випромінювання, здатне до порушення випробовуваних зразків, вторинний фільтр пропускає флуоресценцію в довгохвильовій області, але блокує розсіяне збудження[5].

Детектори флуориметрії перетворять оптичний сигнал в електричний за допомогою фотопомножувачів різних типів. Кожен тип детектора має специфічні властивості: спектральна область максимальної чутливості, ступінь посилення, співвідношення сигнал / шум[5].

Спектрофлуориметри відрізняються від фільтраційних флуориметрів тим, що замість спектральних фільтрів в них використовуються монохроматори типу призми або решітки. Ці прилади є кращими для аналітичних цілей. У спектрофлуориметрів монохроматори забезпечені щілинами. Чим вже щілину, тим вище дозвіл і спектральна чистота, але менше чутливість. Вибір розміру щілини визначається поділом між довжинами хвиль збудливого і випускається випромінювання і необхідним рівнем чутливості[5].

Як джерела збудливого випромінювання в флуориметр використовують[5]:

- Ртутні лампи низького тиску, що надають велику кількість довжин хвиль збудження, але не є джерелом випромінювання рівномірного спектра;

- Ксенонові газорозрядні лампи, що забезпечують високоінтенсивне майже рівномірне випромінювання в широкому діапазоні спектра (300 - 800 нм) і досить інтенсивне в короткохвильовій області аж до 200 нм;

- Лазери, що випромінюють світло високої інтенсивності в дуже вузькому інтервалі довжин хвиль (не більше 0,01 нм) і дозволяють завдяки цьому не використовувати монохроматори або первинні світлофільтри;

- Світлодіоди і світлодіодні матриці, що випромінюють світло в певних діапазонах довжин хвиль[5].

Для розміщення аналізованих проб в флуориметр використовують, як правило, прямокутні кварцові кювети, відполіровані з усіх 4 вертикальних сторін, іноді - циліндричні кювети або пробірки. Зазвичай обсяг випробовуваних зразків становить 2 - 3 мл, але до деяких приладів додаються кювети місткістю від 100 до 300 мкл або капілярні тримачі для ще меншого обсягу[5].

Вимірювання флуоресценції. Флуоресценцію визначають в розчинах з концентрацією від 10-5 М і менш, в діапазоні, для якого спостерігається пряма залежність інтенсивності флуоресценції від концентрації. При більш високих концентраціях все більш значна частина надходить світла абсорбується зразком поблизу поверхні кювети, і лінійна залежність величини сигналу від концентрації речовини порушується[5].

Всі виміри інтенсивності флуоресценції повинні бути скоректовані з розчинником.

Інтенсивність флуоресценції залежить від:

- Температури,

- Розчинника,

- Величини рН випробуваного розчину,

- Присутності в розчині сторонніх часток,

- Концентрації кисню в випробуваному розчині,

- Стороннього освітлення.

Ефективність флуоресценції обернено пропорційна температурі. Для деяких речовин ефективність флуоресценції може знижуватися на 1 - 2% при підвищенні температури на 1 ° С. У таких випадках потрібно термостатировання зразків.
Інтенсивність і спектральний розподіл флуоресценції залежить від розчинника. Багато з'єднання, флуоресціюючі в органічних розчинниках, практично не флуоресціюють в воді[5].

Перед вимірюванням флуоресценції з випробуваного розчину фільтруванням або центрифугуванням повинні бути видалені тверді частинки, так як вони можуть поглинати деяку частку збудливою енергії, дезактивувати порушені молекули або завищувати вимірювану величину через багаторазових відображень в кюветі з зразком[5].

Інтенсивність флуоресценції обернено пропорційна концентрації кисню, що є сильнодіючим гасителем флуоресценції. За ступенем гасіння флуоресценції можна визначати концентрацію кисню в навколишньому середовищі. Для видалення кисню через випробуваний зразок пропускають азот або гелій.
Більшість флуоресціюючих речовин чутливо до світла. Під час опромінювання під флуориметрі вони можуть піддаватися фоторозкладання з утворенням інших флуоресціюючих продуктів. Такі ефекти виявляються при спостереженні за відгуком детектора в часі і можуть бути знижені шляхом приглушення світла за допомогою світлофільтрів або екранів[5].

2.1 Опис флуориметра

Спектрофлуориметр «Флуорат-02-Панорама» - прилад для реєстрації
спектрів пропускання розчинів в УФ і видимій області, а також для
реєстрації спектрів люмінесценції[4].

Зовнішній вигляд приладу показаний на рис. 2.1. Спереду розташовані кнопки управління приладом, зверху - кюветное відділення, куди входять
стандартні кювети з довжиною оптичного шляху 1 см[4].

Рисунок 2.1 – Зовнішній вигляд прилада «Флуорат-02-Панорама» та вид кюветного відділення з кришкою [4]

Edinburgh LifeSpec II - компактний, високоефективний спектрометр для вимірювання часу життя флуоресценції, призначений для використання разом з імпульсними і пікосекундними лазерами з високою частотою повторення імпульсів. Система являє собою повністю автоматизоване рішення, що поєднує в собі апаратні і програмні засоби для виконання фундаментальних досліджень і застосування в ході стандартного лабораторного аналізу. Зовнішній вигляд приладу зображений на рисунку 2.2[6].

Рисунок 2.2 – Зовнішній вигляд Edinburgh LifeSpec II [6]

В Edinburgh LifeSpec II використовується технологія рахунку одиночних фотонів з тимчасової кореляцією (TCSPC) для точності вимірювань часу життя флуоресценції. Його оптика з нульовою тимчасової дисперсією задає стандарти технічних параметрів при вимірюванні надшвидких розпадів[6].

Для Edinburgh LifeSpec II передбачений субтрактивний подвійний монохроматор, який забезпечує нульову тимчасову дисперсію спектрометра і дозволяє приладу виконувати вимірювання часів життя флуоресценції до 5-10 пс[6].

Розширена версія програмного забезпечення керує всіма програмами, а також аналізує попередні дані. За допомогою реконволюціі програми виконують достовірні вимірювання часу життя флуоресценції до однієї десятої функції спрацьовування приладу. Режими збору даних варіюють від даних по розпадів часу життя флуоресценції і спектрів з тимчасовим дозволом до даних автоматичних вимірювань анізотропії з тимчасовим дозволом і автоматичних температурних карт. Edinburgh LifeSpec II в стандартній конфігурації оснащений одним детектором. Можна додати додаткові детектори. Для роботи Edinburgh LifeSpec II потрібно, щонайменше, один пикосекундной імпульсний діодний, імпульсний LED, суперконтінуумний або титан-сапфіровий лазер (з відповідним генератором імпульсів) [6].

Повний комплект спектрометра Edinburgh LifeSpec II включає оптичний спектрометр, модуль харчування і комп'ютер з картою збору даних, TCC900. У стандартній конфігурації в Edinburgh LifeSpec II передбачений один обраний джерело світла і один детектор. Систему можна розширити за допомогою додаткових джерел, детекторів, поляризаторів, охолоджувачів проб і волоконної оптики. Деякі зі згаданих допоміжних засобів можуть бути встановленi-ни тільки на заводі-виробнику. Основний блок Edinburgh LifeSpec II регулюється по висоті, щоб оптична площину розташовувалася на відстані 130-180 мм від поверхні столу[6].

Можливості вимірювання і аналізу

Режими збору даних

• Збір даних по флуоресцентного розпаду

• Спектри флуоресценції з тимчасовим дозволом

• Квазістаціонарні спектри (з корекцією спектра)

• Автоматичні вимірювання анізотропії з тимчасовим дозволом (з додатковими поляризаторами)

• Автоматичні карти температури (з додатковим криостате або утримувач проб Пельтьє з охолодженням)

Режими аналізу даних

• 4-експоненціальне наближення з фоном, зміщенням, реконволюціей (на базі методу Левенберга-Марквардта)

• мультиекспоненційний наближення анізотропії флуоресценції (тільки наближення хвостовій частині)

Вдосконалений аналіз даних (додатково)

• 4-експоненціальне наближення з фоном, зміщенням, реконволюціею; початкові оцінки не потрібні (Ця інформація базується методі власної розробки)

• Аналіз розподілу часів життя з сіткою 200 часів життя і без можливих форм розподілу

• Аналіз партії

• Глобальний аналіз

• Кінетика Ферстера

• Наближення міцелярного демпфірування

• Розширений аналіз експотенціальних компонентів

• Удосконалена кінетика анізотропії флуоресценції з реконволюцією

PD-303S – цифровий флуориметр. Інноваційний спектрофотометр для широкого спектру досліджень мікропроцесорний контроль. Відкрита система для будь-яких методик і реактивів. Використовуються пробірки, квадратні кювети, полумікрокювети, має підключення комп'ютера і принтера. Економічність (об'єм реагенту тільки 0.5-1 мл) [7]. Зовнішній вигляд приладу представлений на рисунку 2.3.

Рисунок 2.3 – Зовнішній вигляд приладу PD-303S [7]

На основі вище розглянутих приладів ми побудували структурну та функціональну схеми для даних типів приладів. Структурна та функціональна схеми приладу представлена в додатках А та Б [4].

Структурна схема показана в додатку А. Вона складається з наступних вузлів. Вхідного фільтра, детектора, каналів вимірювання - енергії імпульсу, пікової потужності і тривалості імпульсу. Для управління вузлами спектрометра, обробки результатів вимірювань і виведення даних на індикатор використовується контролер. Прилад працює в такий спосіб. Сигнал з антени надходить на вхідний фільтр, і далі на детектор. З виходу детектора огинає досліджуваного сигналу надходить на вхідний підсилювач, що забезпечує необхідне посилення в смузі частот узгоджених з параметрами оброблюваних сигналів. Вихідний сигнал підсилювача надходить на три канали обробки-канал вимірювання енергії імпульсу, канал вимірювання пікової потужності і канал вимірювання тривалості. Принцип роботи цих каналів вимірювання енергії та пікової потужності заснований на перетворенні вимірюваного параметра в квазіпостійну напруга. Для цього в каналі вимірювання енергії вхідного сигналу інтегрується, а потім після посилення і подальшої обробки надходить на попередній розширювач тривалості імпульсу. У каналі виміру пікової потужності вхідний сигнал спочатку проходить попередню обробку, а потім так само чинить на розширювач вхідного сигналу. Вимірювання тривалості імпульсу виробляється шляхом перетворення час - амплітуда. Для цього сигнал виходу підсилювача надходить на швидкодіючий амплітудний дискримінатор на яка формує на виході прямокутний імпульс, тривалість якого визначається параметрами вхідного сигналу. Далі цей імпульс надходить на перетворювач час-амплітуда. На виході перетворювача формується пилкоподібний вихідний сигнал, передній фронт якого дорівнює тривалості вхідного сигналу, а амплітуда напруги визначається тривалістю вхідного сигналу. У разі якщо вхідний сигнал складається з декількох вхідних імпульсів, на виході перетворювача амплітуда вихідного сигналу пропорційна сумі тривалостей імпульсів. З виходів каналів вимірювання енергії, пікової потужності і тривалості сигналу напруги пропорційні перетвореним параметрами надходять на входи відповідних амплітудних детекторів. Це необхідно для зменшення помилки в проміжку часу між закінченням перетворень і в період зчитування й обробки отриманих результатів, а також для узгодження з аналого-цифровим перетворювачем (АЦП). З виходів амплітудних детекторів напруги пропорційні рівням відповідних параметрів сигналів надходять на плату контролера в і далі на АЦП. Після закінчення вихідного сигналу керуючий процесор видає команду АЦП на зчитування, що надходять на його вхід, сигналів. АЦП послідовно зчитує надійшли рівні напруг, а потім процесор після зчитування відповідних їм параметрів з таблиць калібрування, зошитах у відповідні пристрої пам'яті, передає їх для індикації на дисплей. Для підрахунку кількості імпульсів використаний вихід дискримінатора, сигнал з якого надходить на, розташований на платі контролера, швидкодіючий лічильник.

Алгоритм роботи приладу передбачає роботу приладу в діалоговому режимі з оператором і перевірку працездатності акумуляторних батарей. Для зменшення температурних похибок прилад калібрується в різних температурних діапазонах, а дані результатів калібрування зашиваються в відповідну область пам'яті. Усунення похибки пов'язаної з температурним прогрівом елементів при включенні приладу досягається за рахунок введення 2-х хвилинного інтервалу після чого вбудований процесор здійснює внутрішнє тестування напруг на акумуляторах і початкових напружень амплітудного детектора і тільки при їх нормальних значеннях дозволяється подальша робота з приладом. Наявність процесорів дозволяє організувати передачу даних результатів вимірювань до віддаленої обчислювальної машині.

Функціональна схема представлена в додатку Б. Висвітлючий промінь, джерелом якого є ксенонова лампа (1), спочатку проходить монохроматор каналу збудження (3), який пропускає випромінювання лише певної довжини хвилі. Після монохроматора промінь за допомогою світлоділильної пластини (5) розділяється на два промені; тільки один з яких через зразок (6). Обидва промені потрапляють згодом на детектори (11, 12), і ступінь погашення випромінювання розчином (Пропускання, I / I0 ≡ T,%) визначається порівнянням інтенсивностей цих променів. Таким чином, оптичну щільність розчину D, що є функцією пропускання, а також спектр (залежність D від довжини хвилі) по відношенню до розчинника, можна отримати, записавши послідовно два спектра - розчину порівняння і випробуваного розчину. Для мінімізації попадання в детектор збудливого випромінювання, під кутом в 90о до висвітлює променю (якщо дивитися щодо кюветного відділення), розташований монохроматор каналу випускання (Флуориметричного каналу) (8), який також із загального спектра
(Флуоресценції або фосфоресценції) виділяє випромінювання з деякою довжиною хвилі. Після цього воно потрапляє в приймач (9), який реєструє його інтенсивність.

Джерелом випромінювання є імпульсна ксенонова лампа (1), яка дозволяє генерувати короткі світлові імпульси тривалістю близько 1 мкс, c частотою повторення до 25 Гц. Це дає можливість досліджувати часові характеристики наведеного випромінювання – дослідити фосфоресценцію, яка триває деякий час після припинення освітлення розчину. Можна також за нетривалий час зробити
кілька незалежних вимірювань пропускання та люмінесценції для безлічі (10, 25, 250) спалахів.

Реєстрація люмінесценції проводиться фотопомножувачем (9). Діапазон вимірювання спектрів поглинання даного приладу - 180 ÷ 860 нм, спектрів випускання - 180 ÷ 720 нм. Таким чином, у складі приладу є два незалежно працюючих монохроматора (3, 8), кожен з яких можна або встановити на певну довжину хвилі, або дати йому завдання сканувати випромінювання по
довжинах хвиль, із записом певного спектру. Керувати роботою приладу можна з передньої панелі , де є кнопки і цифрові індикатори, достатні для цього завдання. Крім того, можна здійснювати і управління, і збір даних з персонального комп'ютера, використовуючи програму Panorama Light, ярлик якої знаходиться на робочому столі комп'ютера[4].

2.2 Порівняльні характеристики флуориметрів

Порівняльні характеристики флуориметрів наведені в таблиці 2.1.

Таблиця 2.1 – Порівняльні технічні характеристики флуориметрів

Флуориметр

Флуорат-02-Панорама

Edinburgh LifeSpec II

PD-303S

Діапазон довжини хвилі, нм

220-920

200-900

340-1000

Точність встановлення довжини хвилі, нм

± 0,4

± 0,4

± 0,2

Дисплей

LCD

LCD

LCD

Зміна довжини хвилі

ручна

ручна

ручна

Інтерфейси

RS232, чи че-рез адаптер USB-COM

RS232

LPT, RS232

Живлення, В

230

90…230

90…240

Робоча температура, оС

5…45

10…40

10…40

Вологість менше ніж, %

80

85

80

Габарити, мм

500х400230

285х265х165

270х285х155

Вага, кг

18

5

4

Ціна

70 400 грн.

122 060 грн

139 950 грн.

3 ОЦІНКА ФУНКЦІОНАЛЬНИХ ХАРАКТЕРИСТИК БІОТЕХНІЧНОЇ СИСТЕМИ

3.1 Класифікація біотехнічної системи

Проведемо класифікаційний аналіз нашої БТС за вказаними ознаками.

Біотехнічні системи класифікують за такими ознаками:

- за функцією дана БТС належить до БТС для лабораторного аналізу;

- за типом операнда: БТС за енергетичним та інформаційним типом сигналу;

- за принципом здійснення робочої дії дана БТС відноситься до біотехнічні до оптичних принципів взаємодії з біологічним об’єктом;

- за характером функціонування: стаціонарна.

- за рівнем складності: комбінована, є складні та прості конструктивні елементи та вузли;

- за способом виготовлення: прилади даного типу майже немають серійного виробництва, тому їх потрібно замовляти. Технічні системи, виготовлені шляхом литва;

- за ступенем конструктивної складності: комбіновані;

- за ступенем оригінальності конструкції: модифіковані технічні системи;

- а типом виробництва: технічні системи, виготовленні в умовах одиничного або серійного виробництва;

- за місцем у технічному процесі, за експлуатаційними властивостями, зовнішнім виглядом, техніко-економічними характеристиками: зовнішній вигляд приладу гарний та приємний, в основному прилади даного типу виконуються в пластикових корпусах прямокутної форми, мають RS232 інтерфейси, що робить ії зручними в використанні та підключенні до комп’ютера.

3.2 Ефективність біотехнічної системи

В загальному вигляді ефективність БТС Е визначається за формулою:

, (3.1)

де R – ефект, що досягається при використанні БТС;

W – витрати на досягнення ефекту.

Під ефектом розуміють певні параметри результату функціонування БТС; в залежності від цільової функції системи це може бути продуктивність, пропускна здатність, кількість інформації, що опрацьовується або отримується, ймовірність виконання задачі тощо.

Витрати, тобто засоби досягнення результату, можуть виражатись роботою (енергією), коштами, психофізичною енергією, кількістю енергоносіїв, часу тощо, які необхідні для досягнення визначеного ефекту.

Метод флуориметрії широко застосовують для кількісного визначення компонентів сумішей різних органічних сполук, розділених тонкошарової хроматографії, добре освітлених в оглядових роботах.

Хоча метод вимагає застосування спеціальних приладів - денситометрів і флуориметрів, його перевагами є висока швидкість вимірювань, відсутність додаткових операцій і відносно висока точність. Слід, однак, мати на увазі, що на відтворюваність результатів вимірювань сильно впливають характер і інтенсивність забарвлення плям. Відносна помилка визначення лежить десь в межах 5-8%. У істотному ступені точність визначення залежить від товщини шару сорбенту. Тому вимірювання при калібрування повинні проводитися на тих же товщині шару, що і в наступних дослідах.

Застосування флуориметрії дало можливість більш детально з'ясувати вплив домішок на світіння урану.

Також даний метод широко застосовують у фармакології. Даний тип приладів призначений для кількісного аналізу вітамінів та інших флуоресціюючих речовин в розчині, з успіхом може бути застосований в різних галузях харчової промисловості, в сільському господарстві, медицині, в науково-дослідних і лікувальних установах, в виробничих і заводських лабораторіях. При відповідному підборі світлофільтрів область застосування приладу може бути значно розширена.

3.3 Оцінювання надійності біотехнічної системи

Розрахунок надійності пристрою полягає у визначенні показників надійності виробу за відомими характеристиками надійності складових елементів і умовами експлуатації. Вихідними показниками розрахунку надійності є інтенсивності відмов блоків БТС за нормальних умов.

Вихідні дані для розрахунку надійності технічної складової БТС наведені у табл. 3.1.

Таблиця 3.1 – Вихідні дані для розрахунків

Блок БТС

Інтенсивність відмов , год–1

Гарантійний період t, год

1. Вхідний фільтр

0,000012

5100

2. Детектор

0,000013

9500

3. Вхідний підсилювач

0,000006

6300

4. Канал виміру енергії

0,000007

5500

5. Канал виміру потужності

0,000001

9200

6. Канал виміру тривалості

0,000016

8600

7.Амплітудний детектор

0,000017

7700

8. Контролер

0,000012

5100

Продовження таблиці 3.1

9. Компаратор

0,000004

6300

10. АЦП

0,000004

10000

11. Дисплей

0,000013

9100

Одразу визначимо період tmin, який за принципом найслабшої ланки визначатиме гарантійний термін роботи всієї БТС. tmin=5100 год.

Скористаємось методикою розрахунку структурної експлуатаційної надійності за допомогою аналізу безвідмовної роботи технічної складової БТС.

В загальному випадку математична модель має вигляд:

, (3.2)

де lе – експлуатаційна інтенсивність відмов, год-1;

l0 – інтенсивність відмов за нормальних умов і номінального електричного навантаження, год-1;

Кі – складові коефіцієнти математичної моделі.

Для технічної складової БТС сумарна інтенсивність відмов складе:

, (3.3)

0,000012+0,000013+0,000006+0,000007+0,000001+0,000016+0,000017+0,000012+0,000004+0,000004+0,000013)=0,000084

де КАМ – коефіцієнт, який залежить від амортизації технічної складовоої; за відсутності системи амортизації у виробі КАМ = 1; у випадку наявності системи амортизації КАМ = 0,8;

КОБСЛ – коефіцієнт, який залежить від якості технічного обслуговування електронної апаратури; для побутових виробів КОБСЛ = 1; у випадку неперіодичного технічного обслуговування КОБСЛ = 0,9; у випадку періодичного ТО з періодом більше місяця КОБСЛ = 0,8; якщо періодичність ТО складає від 1 тижня до 1 місяця, то КОБСЛ = 0,7; якщо періодичність ТО менше тижня, то КОБСЛ = 0,6;

lеі – експлуатаційна інтенсивність і-го блоку БТС;

n – кількість блоків у системі.

Надійність пристрою характеризується напрацюванням на відмову, що обчислюється за формулою

. (3.4)

Т=1/0,000084=9541,985

Обчислимо ймовірність безвідмовної роботи технічної складової БТС за класичною методикою. У загальному випадку на інтервалі часу від 0 до t ймовірність безвідмовної роботи буде визначатись за формулою

. (3.5)

У випадку лінійності функції , що має місце у основній частині життєвого циклу радіоелектронної апаратури (тобто ), попередню формулу можна переписати у вигляді

. (3.6)

Р1(t)=e-0,000012*5100=0,940635; Р7(t)=e-0,000017*7700=0,877306;

Р2(t)=e-0,000013*9500=0,883822; Р8(t)=e-0,000012*5100=0,940635;

Р3(t)=e-0,000006*6300=0,962906; Р9(t)=e-0,000004*6300=0,975115;

Р4(t)=e-0,000007*5500=0,962232; Р10(t)=e-0,000004*10000=0,960789;

Р5(t)=e-0,000001*9200=0,990842; Р11(t)=e-0,000013*9100=0,888429.

Р6(t)=e-0,000016*8600=0,871447;

Обчислимо ймовірності безвідмовної роботи Рі для кожного блоку технічної складової БТС.

На основі одержаних даних можна обчислити загальну ймовірність безвідмовної роботи РТС технічної складової БТС. Її значення залежить від взаємного підключення блоків БТС. У випадку послідовного з’єднання блоків відмова бодай одного з них призведе до виходу з ладу цілої системи. У випадку паралельного сполучення система зможе продовжити функціонування.

Для послідовно сполучених блоків загальна ймовірність безвідмовної роботи визначається за формулою

. (3.7)

Для паралельно сполучених блоків

. (3.8)

Проведемо розрахунок ймовірності безвідмовної роботи технічної складової нашої БТС на основі її функціональної схеми.

На рисунку 3.1 педставлене схематичне зображення структурної схеми технічної складової БТС.

Рисунок 3.1 - Схематичне зображення структурної схеми технічної складової БТС

На схемі 1 – вхідний фільтр; 2 – детектор; 3 – вхідний підсилювач; 4 – канал виміру енергії; 5 – канал виміру потужності; 6 – канал виміру тривалості; 7 – амплітудний детектор; 8 – контролер; 9 – компаратор; 10 – АЦП; 11 – дисплей.

Р8-11 = 1 – (1 – Р8) (1 – Р11) = 1 – (1 – 0,940635)*(1 – 0,888429)=0,993377;

Р7-10 = 1 – (1 – Р7) (1 – Р10) = 1 – (1 – 0,877306)*(1 – 0,960789)=0,995189;

Р9-11 = Р97-10* Р8-11=0,975115*0,993377*0,995189=0,963996;

Р4-11 = Р49-11* Р5* Р6=0,962232*0,963996*0,990842*0,871447=0,800941;

Р= Р12* Р3* Р4-11=0,940635*0,883822*0,962906*0,800941=0,61695.

Розрахуємо значення інтенсивності відмов технічної складової БТС:

.

.

Отже, класифікація елементів технічних систем за ступенем стандартизації і походженням досить важлива для оцінки ремонтопридатності та економічності конструкції. За ступенем стандартизації технічної системи можна судити про доцільність і можливі масштаби її виробництва в рамках даного підприємства.

З економічної точки зору число оригінальних деталей повинно бути якомога меншим, оскільки вони характеризують вимоги до конструкторської і технологічної підготовки виробництва. При мінімальній кількості оригінальних деталей сприятливі умови для організації серійного і масового виробництва.

В даному приладі немає оригінальних деталей.

ВИСНОВОК

Флуориметрія (люмінесцентний аналіз) заснований на вимірюванні вторинного випромінювання, що виникає в результаті взаємодії ультрафіолетового випромінювання з визначальним компонентом. Зміст катіонів, що не володіють власною люмінесценцією, визначають за допомогою флуоресцентних реакцій комплексів катіонів з органічними реагентами. Для визначення змісту індію, галію, танталу і ін.

Метод флуориметрії в 10 - 100 разів чутливіший абсорбційної спектрофотометрії, але флуоресцентними властивостями володіє тільки обмежене коло сполук: ароматичні, особливо з конденсованими структурами, гетероциклічні та карбонільні сполуки. З фармацевтичних субстанцій визначенням методом флуориметрії підлягають амінокислоти (фенілаланін, триптофан, тирозин), алкалоїди (стрихнін, резерпін, хінін), вітаміни (фолієва кислота, рибофлавін, ретинолу ацетат), стероїдні гормони (етинілестрадіол).
Інтенсивність флуоресценції вимірюється в умовних одиницях, пропорційних відгуку детектора і позначається символом I.

Метою даної курсової роботи було розглянути та проаналізувати систему флуориметрії, розглянути прилади для флуориметрії та на їх основі розробити структурну та функціональну схеми для даних типів приладів, що ми і зробили в роботі. Завдання курсової роботи були виконані, а саме:

1. Провели огляд біологічної складової біотехнічної системи та проаналізували принципи взаємодії її з технічною складовою.

2. Провели аналіз технічної складової біотехнічної системи.

3. Розробили схему електричну структурну та схему електричну функціональну біотехнічної системи.

4. Здійснили оцінювання функціональних характеристик біотехнічної системи, тобто зробили її класифікацію, оціннювання ефективності та надійності.

5. Зробили відповідні висновки.

СПИСОК ВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ

1. Гришаева Т. И. Методы люминесцентного анализа. — С.-Петербург: НПО «Профессионал», 2003. — 226 с.

2. Харитонов Ю.Я. «Аналитическая химия. Аналитика 2. Количественный анализ. Физико-химические (инструментальные) методы». - "ГЭОТАР-Медиа", 2014. – 554 с.

3. Новый справочник химика и технолога. Аналитическая химия, Ч.1 / Редкол.: Калинкин И. П. и др.. — СПб.: АНО НПО «Мир и семья», 2002. — 964 с.

4. Лакович Д. Основы флуоресцентной спектроскопии. М.: Мир. 1986.

5. Министерство здравоохранения российской федерати «Общая фармакопейная статья: Флуориметрия» ОФС. Взамен ГФ ХП, ч.1 ОФС 42-0045-07

6. Технічна документація до Edinburgh LifeSpec II

7. Технічна документація до PD-303S.

ДОДАТКИ

Додаток А

Схема електрична структурна

Додаток Б

Схема електрична функціональна

Источник: портал www.KazEdu.kz

Другие материалы

  • Явище люмінесценції
  • ... цього методу відноситься до глибокої старовини. Віками люди спостерігали за світінням у темряві гнилого дерева, комах, однак природа цього явища тривалий час залишалася нерозкритої. Рукописні зведення про люмінесценцію починаються з Каскаріоло, що у 1604 р. синтезував першу штучну речовину здатну ...

Каталог учебных материалов

Свежие работы в разделе

Наша кнопка

Разместить ссылку на наш сайт можно воспользовавшись следующим кодом:

Контакты

Если у вас возникли какие либо вопросы, обращайтесь на email администратора: admin@kazreferat.info